Работа 5. Изучение влияния действия химических

агентов на нервно-мышечный препарат лягушки

(КСl, новокаин, кураре)

Задание 1. Исследование действия КСl или новокаина

на сокращение мышц

Воздействие химических или наркотических веществ на участок нерва между раздражающими электродами и мышцей через некоторое время сопровождается прекращением мышечных сокращений в ответ на раздражение. Это связано с изменением лабильности, возбудимости и проводимости нерва. По окончании воздействия нерв медленно восстанавливает свои исходные функциональные свойства. Это явление Н.Е. Введенский назвал парабиозом. Парабиоз характеризуется постепенным развитием, в котором выделяют три фазы: уравнительную, парадоксальную и тормозную.

Цель работы: изучить действие КСl или новокаина на сокращение мышц лягушки.

Объект исследования: лягушка.

Для работы необходимы: электростимулятор ЭСЛ-1; механоэлектрический преобразователь; самописец Н3031-1; универсальный штатив; электроды; препаровальный набор; вата; лигатура; 0,5% раствор новокаина; 1% раствор КСl; раствор Рингера.

Ход работы. Приготовьте нервно-мышечный препарат и установите его в камеру. Раздражая нерв одиночными стимулами, регистрируйте кривые мышечного сокращения. Определите параметры раздражения для получения слабого и сильного сокращения мышц. Парабиотический очаг создают наложением кусочка ваты, смоченного 1% раствором КС1 или 0,5% раствором новокаина (можно использовать другие вещества: 2% раствор хлороформа, эфир, спирт и т. п.). На фоне действия этих веществ проводят стимуляцию нерва с помощью электродов, расположенных выше альтерированного участка. Через некоторое время можно обнаружить, что при увеличении и уменьшении силы раздражения регистрируются одинаковые по амплитуде сокращения. Это свидетельствует о наступлении уравнительной фазы парабиоза. Далее следует парадоксальная фаза, когда слабые стимулы вызывают высокоамплитудные сокращения и наоборот. Наконец, мышца вообще перестает сокращаться и при сильных, и при слабых раздражениях, что характерно для тормозной стадии парабиоза.

Оформите протокол опыта. Вклейте в тетрадь полученные кривые, расположив их по фазам парабиоза и в соответствии с параметрами раздражения.

Задание 2. Исследование действия кураре на сокращение мышц

Цель работы: изучить действие кураре на сокращение мышц лягушки.

Объект исследования: лягушка.

Для работы необходимы: электростимулятор ЭСЛ-1; механоэлектрический преобразователь; самописец Н3031-1; электроды; переключатель; набор препаровальных инструментов; 0,1% раствор кураре; раствор Рингера.

Ход работы. Подготовьте лягушку к опыту. Регистрируйте сокращение икроножной мышцы с помощью самописца и определите пороговые величины раздражающего тока для седалищного нерва и непосредственно для икроножной мышцы. В лимфатический мешок лягушки введите миорелаксин (0,1–0,3 мл). Сразу после введения препарата стимулируйте седалищный нерв с частотой 1 Гц при силе раздражающего тока, втрое превышающей пороговую величину. Запишите сокращение мышцы и наблюдайте постепенное снижение амплитуды сокращения. По окончании сокращения мышцы увеличивайте амплитуду одиночных стимулов и вновь добейтесь сокращения, отмечая при этом параметры раздражающего тока. В процессе эксперимента убедитесь в том, что икроножная мышца перестает сокращаться при любых величинах раздражающего тока. Затем перейдите к прямому раздражению мышцы. Для этого переставьте раздражающие электроды непосредственно на мышцу, убрав предварительно усиление ручкой грубой и плавной регулировки амплитуды импульсов. Установите на стимуляторе пороговую величину раздражающего импульса для мышцы (ее определили в начале опыта) и включите раздражение. Плавно увеличивая амплитуду раздражающего тока, добейтесь сокращения мышцы и отметьте в протоколе пороговую величину импульса. Убедитесь в том, что, несмотря на введение миорелаксина при прямом раздражении мышцы, пороговая величина стимула изменилась незначительно. Увеличивайте амплитуду раздражающих импульсов и наблюдайте увеличение амплитуды сокращения мышцы. Затем вновь нанесите раздражение на седалищный нерв и убедитесь, что мышца не сокращается.

Оформите протокол опыта. Зарисуйте схему задачи 2 и вклейте в тетрадь записи, полученные при прямом и непрямом раздражении мышцы. Сформулируйте выводы на основе полученных результатов.