ПРИЛОЖЕНИЕ

1. Приготовление буферных растворов

1.1. Ацетатный буфер (0,2 М), рН = 3,6–5,8

СН₃СООNa × 3H₂O, М = 136,09 г/моль; 0,2 М раствор содержит 27,22 г/л.

pH при 18 °С	СН3СООNa 0,2 М, мл	СН3СООН 0,2 M, мл	pH при 18 °С	СН3СООNa 0,2 М, мл	СН3СООН 0,2 M, мл
3,6	7,5	92,5	4,8	59,0	41,0
3,8	12,0	88,0	5,0	70,0	30,0
4,0	18,0	82,0	5,2	79,0	21,0
4,2	26,5	73,5	5,4	86,0	14,0
4,4	37,0	63,0	5,6	91,0	9,0
4,6	49,0	51,0	5,8	94,0	6,0

1.2. Фосфатный буфер (0,1 М), рН = 5,8–8,0

Na₂HPO₄× 2Н₂О; М = 178,05 г/моль; 0,2 М раствор содержит 35,61 г/л.

Na₂HPO₄× 12Н₂О; М = 358,22 г/моль; 0,2 М раствор содержит 71,64 г/л.

NaH₂PO₄× Н₂O; М = 138,0 г/моль; 0,2 М раствор содержит 27,6 г/л.

NaH₂PO₄× 2Н₂О; М = 156,03 г/моль; 0,2 М раствор содержит 31,21 г/л.

pH при 25 °С	Na2HPO4 0,2 М, мл	NaH2PO4 0,2 М, мл	Н2О, мл	pH при 25 °С	Na2HPO4 0,2 М, мл	NaH2PO4 0,2 М, мл	Н2О, мл
5,8	8,0	92,0	до 200	7,0	61,0	39,0	до 200
6,0	12,3	87,7	" 200	7,2	72,0	28,0	" 200
6,2	18,5	81,5	" 200	7,4	81,0	19,0	" 200
6,4	26,5	73,5	" 200	7,6	87,0	13,0	" 200
6,6	37,5	62,5	" 200	7,8	91,5	8,5	" 200
6,8	49,0	51,0	" 200	8,0	94,7	5,3	" 200

1.3. Фосфатный буфер (0,067 М), рН = 4,49–9,18

Na₂HPO₄× 2Н₂О; M = 178,05 г/моль; 0,067 М раствор содержит 11,876 г/л.

КH₂PO₄; M = 136,09 г/моль; 0,067 М раствор содержит 9,078 г/л.

pH при 25°С	Na2HPO4 0,067 М, мл	КH2PO4 0,067 М, мл	pH при 25 °С	Na2HPO4 0,067 М, мл	КH2PO4 0,067 М, мл
4,49	0,0	100,0	6,98	60,0	40,0
4,94	1,0	99,0	7,17	70,0	30,0
5,29	2,5	97,5	7,38	80,0	20,0
5,59	5,0	95,0	7,73	90,0	10,0
5,91	10,0	90,0	8,04	95,0	5,0
6,24	20,0	80,0	8,34	97,5	2,5
6,47	30,0	70,0	8,67	99,0	1,0
6,64	40,0	60,0	9,18	100,0	0
6,81	50,0	50,0

1.4. Фосфатный буфер (0,05 М), рН = 5,8–8,0

КH₂PO₄; М = 136,09 г/моль.

Состав: 5 мл 0,2 М КН₂PO₄ (27,218 г/л) + x мл 0,2 М NаОН, разбавляют водой до 20 мл.

pH при 25 °С	Натриевая или калиевая щелочь 0,2 М, мл	pH при 25 °С	Натриевая или калиевая щелочь 0,2 М, мл
5,8	0,36	7,0	2,91
6,0	0,56	7,2	3,47
6,2	0,81	7,4	3,91
6,4	1,16	7,6	4,24
6,6	1,64	7,8	4,45
6,8	2,24	8,0	4,61

1.5. Имидазольный буфер (0,05 М), рН = 6,2–7,8

Имидазол, С_зH₄N₂; М = 68,08 г/моль.

Состав: 25 мл 0,2 М имидазола (13,82 г/л) + x мл 0,1 М HCl; разбавляют водой до 100 мл.

pH при 25 °С	Соляная кислота 0,1 М, мл	pH при 25 °С	Соляная кислота 0,1 М, мл
6,2	42,9	7,2	18,6
6,4	39,8	7,4	13,6
6,6	35,5	7,6	9,3
6,8	30,4	7,8	6,0
7,0	24,3

1.6. Трис-буфер (0,05 М), pH = 7,2–9,1

Трис (гидроксиметил) аминометан (С₄Н₁₁NO₃); М = 121,14 г/моль.

Состав: 25 мл 0,2 М триса (24,228 г/л) + x мл 0,1 М HCl; разбавляют водой до 100 мл

pH		Соляная кислота 0,1 М, мл
при 23 °С	при 37 °С
9,10	8,95	5,0
8,92	8,78	7,5
8,74	8,60	10,0
8,62	8,48	12,5
8,50	8,37	15,0
8,40	8,27	17,5
8,32	8,18	20,0
8,23	8,10	22,5
8,14	8,00	25,0
8,05	7,90	27,5
7,96	7,82	30,0
7,87	7,73	32,5
7,77	7,63	35,0
7,66	7,52	37,5
7,54	7,40	40,0
7,36	7,22	42,5
7,20	7,05	45,0

1.7. Концентрация растворов и способы ее выражения

Концентрацию растворов можно выражать по-разному. При биохимических анализах наиболее употребительны следующие способы выражения концентраций.

Массовая доля растворенного вещества. Массовая доля показывает, сколько единиц массы растворенного вещества содержится в 100 единицах массы раствора. Массовая доля – безразмерная величина, ее выражают в долях единиц или процентах:

где w – массовая доля ( %) растворенного вещества; m₁ – масса растворенного вещества, г; m – масса раствора, г.

Масса раствора равна произведению объема раствора V на его плотность r: m = r · V, тогда

В биохимической практике наиболее часто выражают концентрацию в объемных процентах – количество вещества в г в 100 мл раствора. Иногда концентрацию вещества выражают в мг % (количество вещества в мг в 100 мл раствора).

При приготовлении растворов следует учитывать и указывать, как выражена концентрация:

% (вес/вес) – г вещества в 100 г раствора;

% (вес/объем) – г вещества в 100 мл раствора;

% (объем/вес) – мл вещества в 100 г раствора;

% (объем/объем) – мл вещества в 100 мл раствора.

Молярная концентрация раствора. Молярная концентрация (молярность) раствора показывает количество молей растворенного вещества, содержащегося в 1 л раствора.

Молярную концентрацию (моль / л) выражают формулой

где m – масса растворенного вещества, г; M – молярная масса растворенного вещества, г / моль; V – объем раствора, л.

Молярность раствора записывается числовым значением молярной концентрации растворенного вещества, выраженной в моль/л, с последующей буквой М или словом «молярный». Например, 1 М HCl.

Нормальная концентрация. Нормальная концентрация раствора показывает, сколько грамм-эквивалентов (эквивалентной массы) растворенного вещества содержится в 1 л раствора:

где m – масса растворенного вещества, г; М_Э – эквивалентная масса растворенного вещества, г/ моль; V – объем раствора, л.

Нормальность раствора обозначается символом N или н. Например, 0,1 н. и 0,01 н.

2. Плотность (г/мл) водных растворов некоторых веществ
при 20 °С

w, %	H2SO4	HNO3	HCl	NaOH	KOH	NH3 ×H2O
5	1,032	1,026	1,023	1,054	1,044	0,977
10	1,066	1,054	1,047	1,109	1,090	0,958
15	1,102	1,084	1,073	1,164	1,138	0,940
20	1,139	1,115	1,098	1,219	1,186	0,923
25	1,178	1,147	1,124	1,274	1,236	0,907
30	1,219	1,180	1,149	1,328	1,288	0,892
35	1,260	1,214	1,174	1,380	1,341	-
40	1,303	1,246	1,198	1,430	1,396	-
45	1,348	1,278	-	1,478	1,452	-
50	1,395	1,310	-	1,525	1,511	-
55	1,445	1,339	-	-	-	-
60	1,498	1,367	-	-	-	-
65	1,553	1,391	-	-	-	-
70	1,611	1,413	-	-	-	-
75	1,669	1,434	-	-	-	-
80	1,727	1,452	-	-	-	-
85	1,779	1,469	-	-	-	-
90	1,814	1,483	-	-	-	-
95	1,834	1,493	-	-	-	-

3. Концентрация и плотность концентрированных кислот и аммиака (приблизительные значения)

Вещество	Молекулярная масса, г/моль	Кон-центрация, %	Молярная концентрация, моль/л	Кол-во, необходимое для приготовления 1 л 1 М раствора, мл	Плотность, г/мл
Азотная к-та	63,01	70	15,7	63,7	1,42
Серная к-та	98,07	98	18,3	54,5	1,835
Соляная к-та	36,46	36	11,6	85,9	1,18
Уксусная к-та	60,05	99,6	17,4	57,5	1,05
Фосфорная к-та	98,00	85	14,7	67,8	1,70
Хлорная к-та	100,46	60 72	9,2 12,2	108,8 82,1	1,54 1,70
Аммиак	17,03	25 35	13,3 18,1	75,1 55,2	0,91 0,88

4. Единицы измерений

Единицы длины: 1 см = 0,01 м = 10 мм; 1 мм = 1 000 мк.

Единицы объема: 1 см³ = 1 мл = 0,001 л = 1 000 мкл.

Единицы веса: 1 г = 0,001 кг = 1 000 мг; 1 мг = 1 000 мкг.

5. Математические константы

p = 3,1416; е = 2,718.

6. Некоторые коэффициенты пересчета

Температура: K = °C + 273; °С = (F – 32).

Энергия: 1 Дж = 10⁷ эрг = 0,239 кал; 1 кал = 4,184 Дж.

Давление: 1 Тор = 1 мм рт. ст. = 1,32×10^–3 атм. = 133,322 Па;

1 атм = 760 мм рт. ст. = 1,013250 · 105 Па.

7. Молярные коэффициенты поглощения некоторых

соединений в УФ и видимых областях

Вещество	Длина волны λ, нм	Молярный коэф. поглощения ελ, л см^–1 моль^–1	Примечание
НАДН	259	16900	рН 7,5, водный раствор
	339	6220
НАД	260	18000	рН 7,0
НАДФН	259	16900	рН 7,5
НАДФ	260	18000	рН 7,0
Аденозин	259,5	14900
Гуанин	246	10700
Урацил	259,5	8200
Тимин	264,5 219	7900 47000
Триптофан	280 219	5600 47000
Тирозин	222 274	8000 1400
Фенилаланин	206 257	9300 200
Токоферол	258	3810	Раствор в этаноле
Рибофлавин	266	32500	В 0,1 М фосфатном буфере рН 7,0
Витамин А	325	52480	Раствор в этаноле
Дегидроэргостерол	329	10500	Раствор в метаноле
ДНФ-гидрозоны карбонильных соединений	340	22000

8. Множители и приставки для образования десятичных кратных и дольных единиц и их наименования

Множитель	Прис-тавка	Обозначение приставки		Множитель	Прис-тавка	Обозначение приставки
		межд.	рус.			межд.	рус.
10^18 10^15 10^12 10^9 10^6 10^3 10^2 10^1	экса пета тера гига мега кило гекто дека	E P T G M k h da	Э П Т Г М к г да	10^–1 10^–2 10^–3 10^–6 10^–9 10^–12 10^–15 10^–18	деци санти милли микро нано пико фемто атто	d c m m n p f a	д с м мк н п ф а

9. Неметрические единицы длины и массы, применяющиеся в Англии и США, и их перевод в единицы СИ

Единицы		Перевод в единицы СИ
Наименование	Обозначение
Ярд (jard) Фут (foot) Дюйм (inch) Фунт (pound) Унция (ounce)	jd ft in oz eb	0,914 м 0,305 м 0,0254 м 0,454 кг 0,0283 кг

10. Латинский алфавит

Печатные буквы	Рукописные буквы	Название	Печатные буквы	Рукописные буквы	Название
A a B b C c D d E e F f G g H h I i J j K k L l M m	A a B b C c D d E e F f G g H h I i J j K k L l M m	а бэ цэ дэ э эф гэ (жэ) ха (аш) и йот (жи) ка эль эм	N n O o P p Q q R r S s T t U u V v W w X x Y y Z z	N n O o P p Q q R r S s T t U u V v W w X x Y y Z z	эн о пэ ку эр эс тэ у вэ дубль-вэ икс игрек зэт

11. Греческий алфавит

Печатные буквы	Название	Печатные буквы	Название
A a	альфа	N n	ню (ни)
B b	бета	X x	кси
G g	гамма	O o	омикрон
D d	дельта	P p	пи
E e	эпсилон	Rr	ро
Z z	дзета	S s	сигма
H h	эта	T t	тау
Q q	тэта	U u	юпсилон (ипсилон)
I i	йота	F f	фи
K k	каппа	C c	хи
L l	ламбда	Y y	пси
M m	мю (ми)	W w	омега

12. Таблица Стьюдента. Значение коэффициента для малой выборки

k	Уровень значимости Р
	0,2	0,1	0,05	0,02	0,01	0,001
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	1,64 1,53 1,48 1,44 1,46 1,40 1,38 1,37 1,36 1,36 1,35 1,35 1,34 1,34 1,33 1,33 1,33 1,33 1,32 1,32 1,32 1,32 1,32 1,32 1,31 1,31 1,31 1,31	2,35 2,13 2,02 1,94 1,90 1,86 1,83 1,81 1,80 1,78 1,77 1,76 1,75 1,75 1,74 1,73 1,73 1,73 1,72 1,72 1,71 1,71 1,71 1,71 1,70 1,70 1,70 1,70	3,20 2,87 2,57 2,45 2,37 2,31 2,26 2,23 2,20 2,18 2,16 2,15 2,13 2,12 2,11 2,10 2,09 2,09 2,08 2,07 2,07 2,06 2,06 2,06 2,05 2,05 2,05 2,04	4,54 3,75 3,37 3,14 3,00 2,90 2,82 2,76 2,72 2,68 2,65 2,62 2,60 2,58 2,57 2,55 2,53 2,53 2,52 2,51 2,50 2,49 2,49 2,48 2,47 2,47 2,46 2,46	5,84 4,60 4,03 3,71 3,50 3,36 3,25 3,17 3,11 3,06 3,01 2,98 2,95 2,92 2,90 2,88 2,86 2,85 2,83 2,82 2,81 2,80 2,79 2,78 2,77 2,76 2,76 2,75	12,94 8,61 6,86 5,96 5,41 5,04 4,78 4,59 4,49 4,32 4,22 4,14 4,07 4,02 3,97 3,92 3,88 3,85 3,82 3,79 3,77 3,75 3,73 3,71 3,69 3,67 3,66 3,65

13. Периодическая система химических элементов – таблица Менделеева Д.И.

14. Номограмма

Номограмма для вычисления числа G. Число G представляет отношение ускорения центробежной силы в центрифуге (w²r) к ускорению силы земного тяготения (g = 980 см/с²). G = 1,11 × 10^–5 × r × u², где r – расстояние от оси вращения до середины ячейки или пробирки в сантиметрах; u – скорость вращения ротора в об./мин.

Для расчета числа G по номограмме надо соединить прямой линией величины радиуса (r) и скорости вращения ротора (об./мин). Число G устанавливают по месту пересечения со средней шкалой. Следует обратить внимание на то, что левая сторона шкалы G соответствует левой стороне шкалы «об./мин» правая – правой.

С помощью номограммы возможно решение и обратной задачи: с целью создания определенного числа G рассчитать число об./мин для ротора известного радиуса.