ТЕМА 7. ЭЛЕКТРОЛИТНЫЙ СОСТАВ ПЛАЗМЫ
КРОВИ
Содержание темы. Общая характеристика электролитного
состава плазмы. Содержание, пределы колебаний, роль натрия, калия, кальция,
магния, фосфора, железа в крови. Микроэлементы крови и их роль. Регуляция водно-солевого
состава крови.
Вопросы для обсуждения
1.
Важность электролитного состава плазмы крови для поддержания ее
осмотического давления, кислотно-щелочного состояния, функций клеточных
элементов крови и сосудистой стенки, активности ферментов, процессов свертывания
крови и фибринолиза.
2.
Влияние электролитного состава на возбудимость и сократимость,
секреторную активность и проницаемость мембран, биоэнергетические процессы.
3.
Макроэлементы – катионы: натрий, калий, кальций, железо и анионы: Cl–, HCO3–,
HPO42–; их роль, содержание.
4.
Микроэлементы и их роль.
Тестовые задания для
самоконтроля
|
1 |
Физиологическое значение электролитов крови заключается в
следующем 1. Участии в иммунных реакциях 2. Создании онкотического давления 3. Поддержании относительного
постоянства осмотического давления 4. Поддержании вязкости крови |
|
2 |
Минеральные вещества в крови могут
находиться в следующем состоянии 1. Ионно- и молекулярно-дисперсном состоянии 2. Составе липопротеинов 3. Составе сложных органических соединений (чаще в
комплексе с белками) 4. Комплексе с триацилглицеролами |
|
3 |
Установите соответствие в распределении натрия (в %) между
тканями, жидкостями организма и клетками 1. Внеклеточная жидкость 2. Клетки 3. Кости A.
6 Б. 44 В. 50 |
|
4 |
Установите соответствие между компонентами крови и концентрацией
натрия 1. Цельная кровь 2. Эритроциты 3. Плазма A.
9-13 ммоль/л Б. 135-150 ммоль/л В. 70-90 ммоль/л |
|
5 |
Натрий в организме участвует в
следующем процессе 1. Минерализации скелета 2. Поддержании осмотического
давления крови 3. Свертывании крови 4. Регуляции уровня глюкозы |
|
6 |
Гормон, регулирующий процесс
активной реабсорбции натрия, носит следующее название 1. Тироксин 2.
Альдостерон 3. Кальцитонин 4. Соматотропин |
|
7 |
Содержание К+ (ммоль/л)
в сыворотке крови равно следующему значению 1. 4,7-6,2
2. 2,5-4,8 3. 5,2-7,4
4. 3,6-5,0 |
|
8 |
Установите соответствие между
клетками, тканями и концентрацией калия 1. Эритроциты 2. Мышцы 3. Мозг 4. Сердечная мышца A.
84 ммоль/л Б. 115 ммоль/л В. 100 ммоль/л Г. 64 ммоль/л |
|
9 |
Установите соответствие между
гормонами и их влиянием на обмен калия 1. Альдостерон 2. Инсулин A. Уменьшает выделение К+
с мочой B. Увеличивает выведение К+, задерживает Na+ в организме |
|
10 |
Установите соответствие между
концентрацией ионов калия и их влиянием на деятельность сердца 1. Физиологические концентрации 2. Высокие токсические
концентрации 3. Выше 10 мм/л A.
Угнетается автоматизм и сократимость сердца B.
Понижается возбудимость и проводимость миокарда C. Происходит
блокада сердца |
|
11 |
Концентрация Ca2+ в
сыворотке крови (ммоль/л) человека составляет следующую величину 1. 3,6-5,0 2. 0,8-2,2 3. 2,3-2,7
4. 0,92-1,25 |
|
12 |
Содержание недиффундирующего Ca2+
в плазме крови составляет следующую величину 1. ~3,2 ммоль/л 2. ~2,3 ммоль/л 3. ~0,9 ммоль/л 4. ~1,25
ммоль/л |
|
13 |
Установите соответствие между
фракциями кальция и их содержанием в плазме крови 1. Недиффундирующий 2. Диффундирующий 3. Ионизированный 4. Неионизированный A.
1,60 мМ/л Б. 0,35 мМ/л В. 1,25 мМ/л Г. ~0,9 мМ/л |
|
14 |
Следующие гормоны участвуют в
регуляции уровня кальция в крови 1. Альдостерон 2. Инсулин 3. Паратирин (паратгормон) 4. Кальцитонин |
|
15 |
Содержание фосфатов в плазме крови
(ммоль/л) составляет следующую величину 1. 3,6-5,0
2. 0,8-2,2
3. 2,5-4,8
4. 0,92-1,25 |
Лабораторная работа №15
Количественное определение
содержания общего калия
в сыворотке (плазме) крови
турбидимитрическим
методом без депротеинизации
Принцип
метода. В результате реакции между ионами калия и
тетрафенилборатом образуется стабильная суспензия. Мутность суспензии
пропорциональна концентрации ионов калия в анализируемой пробе и измеряется
фотометрически при длине волны 578 (570-590) нм.
Исследуемый
материал. Свежая гепаринизированная плазма или сыворотка крови
без следов гемолиза.
Состав
набора.
1.
Монореагент.
2. Калибратор (калибровочный
раствор калия хлорида с концентрацией 5,0 ммоль/л).
Подготовка
реагентов к процедуре анализа и их стабильность. Монореагент
и Калибратор после вскрытия флакона можно хранить при +2-8°С в защищенном от света
месте не более 6 месяцев.
Ход анализа
Приготовьте пробы в соответствии с
табл. 15. Анализируемую пробу, калибратор и бидистиллированную воду внесите на
дно пробирки и затем добавьте монореагент.
Таблица 15
|
Состав проб |
Опытная проба |
Калибровочная проба |
Контрольная проба |
|
Монореагент, мл |
2,0 |
2,0 |
2,0 |
|
Сыворотка (плазма) крови,
мл |
0,05 |
– |
– |
|
Калибратор, мл |
– |
0,05 |
– |
|
Вода
дистиллированная, мл |
– |
– |
0,05 |
Реакционную смесь перемешайте и
инкубируйте точно 10 минут при комнатной температуре (+18-25°С).
Непосредственно перед измерением оптической плотности пробы перемешать. Измерьте
оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной (холостой)
пробы при длине волны 578 (570-590) нм в кювете с длиной оптического пути 1,0
см.
Расчет
концентрации калия в исследуемом образце проведите по формуле:
,
где С – концентрация калия в плазме крови в моль/л; Е пробы – оптическая плотность опытной
пробы; Е калибратора – оптическая
плотность калибровочной пробы; 5 ммоль/л – концентрация калия в калибраторе.
Нормальные
значения концентрации калия: в сыворотке крови
3,6-5,5 ммоль/л; в плазме крови
4,0-4,8 ммоль/л.
ЗАДАНИЕ
1. Определите содержание калия в сыворотке и плазме
крови.
2. Сделайте вывод.
|
|
|
|
|
|
Лабораторная работа №16
Количественное определение
содержания натрия в
сыворотке (плазме) крови
колориметрическим методом
Принцип
метода. Натрий связывается ионами осаждающего реагента с
образованием нерастворимого комплекса. Оставшиеся в растворе ионы осаждающего
реагента образуют окрашенное соединение с тиогликолятом. Интенсивность окраски
реакционной среды обратно пропорциональна содержанию натрия в исследуемом материале
и определяется фотометрически при длине волны 405 (400-410) нм.
Исследуемый
материал. Свежая гепаринизированная плазма или сыворотка крови
без следов гемолиза.
Состав
набора.
1.
Реагент 1 (осаждающий реагент).
2. Реагент 2 (тиогликолят аммония).
3. Калибратор (калибровочный
раствор натрия хлорида с концентрацией 150 ммоль/л).
Подготовка
реагентов к процедуре анализа и их стабильность. Вскрытые
флаконы с реагентами стабильны в течение 3-х месяцев при условии достаточной
герметизации флаконов и хранении в защищённом от света месте при комнатной
температуре (+18-25°С).
Тщательно закрывайте флаконы с
реагентами после каждого использования!
Ход анализа
Для осаждения натрия подготовьте
пробы в соответствии с табл. 16.
Таблица 16
|
Состав проб |
Опытная проба |
Калибровочная проба |
Контрольная проба |
|
Реагент 1, мл |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
|
Сыворотка (плазма)
крови, мл |
0,02 |
– |
– |
|
Калибратор, мл |
– |
0,02 |
– |
|
Вода
бидистиллированная, мл |
– |
– |
0,02 |
Пробы тщательно перемешайте и инкубируйте
5 мин при комнатной температуре (+18-25°С); затем снова перемешайте в течение 30
секунд и выдержите 30 мин в защищённом от света месте.
Осадите центрифугированием все
пробы при 900 g в течение 10 мин. Для дальнейшего анализа используйте
прозрачную надосадочную жидкость (супернатант).
Для определения концентрации натрия
подготовьте пробы в соответствии с табл. 17.
Таблица 17
|
Состав проб |
Опытная проба |
Калибровочная проба |
Контрольная проба |
|
Реагент 2, мл |
4,0 |
4,0 |
4,0 |
|
Супернатант опытной
пробы, мл |
0,04 |
– |
– |
|
Супернатант
калибровочной пробы, мл |
– |
0,04 |
– |
|
Супернатант
контрольной пробы, мл |
– |
– |
0,04 |
Реакционную смесь тщательно
перемешайте и инкубируйте в течение 5 мин при комнатной температуре (+18-25°С).
После окончания инкубации измерьте оптическую плотность опытной, калибровочной
и контрольной (холостой) проб против воды при длине волны 405 нм в кювете с
длиной оптического пути 1,0 см.
Окраска растворов стабильна в
течение 25 мин после окончания инкубации при хранении проб в защищённом от
света месте при комнатной температуре (+18-25°С).
Расчет
концентрации натрия произведите по формуле:
,
где С – концентрация натрия в
плазме (сыворотке) крови в моль/л; Еконтр. – оптическая плотность
контрольной пробы; Епробы – оптическая плотность опытной пробы; Екалибр.
– оптическая плотность калибровочной пробы; 150 ммоль/л – концентрация натрия в
калибраторе.
Нормальные
значения концентрации натрия в сыворотке крови и в
плазме крови 135-150 ммоль/л.
ЗАДАНИЕ
1. Определите содержание натрия в
сыворотке (плазме) крови.
2. Сделайте вывод.
|
|
|
|
|
|
|
|
Лабораторная работа №17
Определение содержания кальция в
плазме (сыворотке)
крови колориметрическим методом
Принцип
метода. Кальций в слабокислой среде
образует окрашенный комплекс с Арсеназо III. Интенсивность окраски при длине
волны 650 нм (630-670) нм пропорциональна концентрации кальция в пробе. Влияние
магния маскируется гидроксихинолинсульфоновой кислотой.
Исследуемый
материал (образец). Свежая сыворотка или плазма крови (без
ЭДТА).
Состав
набора.
1. Реагент № 1 – Монореагент
фосфатный буфер, рН 7.5 – 50 ммоль/л; арсеназо III – 200 ммоль/л,
гидроксихинолинсульфоновая кислота – 5 ммоль/л.
2. Калибратор. Кальций – 2,27
ммоль/л (9,1 мг/100 мл).
Приготовление
рабочего реагента. Все реагенты готовы к использованию.
Ход
работы
Для определения концентрации натрия
подготовьте пробы в соответствии с табл. 18.
Таблица 18
|
Состав проб |
Опытная проба |
Калибровочная проба |
Контрольная проба |
|
Образец, мл |
0,1 |
– |
– |
|
Бидистиллированная (деионизированная) вода |
– |
– |
0,1 |
|
Реагент 1, мл |
2,0 |
2,0 |
2,0 |
|
Реагент 2, мл |
2,0 |
2,0 |
2,0 |
|
Калибратор, мл |
– |
0,1 |
– |
Пробы тщательно перемешайте и инкубируйте
в течение 5 мин при комнатной температуре (+18-25°С) или 37°С. После окончания инкубации
измерьте оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной
(холостой) при длине волны 570 (540-590) нм в кювете с длиной оптического пути
1,0 см.
Окраска растворов стабильна в
течение 1 ч после окончания инкубации.
Расчет
концентрации кальция произведите по формуле:
,
где С – концентрация кальция в
плазме в ммоль/л; Е пробы –
оптическая плотность опытной пробы; Е
калибратора – оптическая плотность калибровочной пробы; 205 ммоль/л – концентрация
кальция в калибраторе.
Примечания.
1. Основным источником ошибок
является загрязнение посуды, кювет. Рекомендуется использование одноразовой
пластиковой посуды.
2. Стеклянную посуду необходимо
мыть бидистиллированной или деионизированной водой.
Нормальные
значения концентрации кальция в сыворотке и в плазме
крови составляет 2,02-2,60 ммоль/л.
ЗАДАНИЕ
1. Определите содержание натрия в
сыворотке (плазме) крови.
2. Сделайте вывод.
|
|
|
|
|
|
|
|