Лабораторная работа №15

Количественное определение содержания общего калия

в сыворотке (плазме) крови турбидимитрическим

методом без депротеинизации

Принцип метода. В результате реакции между ионами калия и тетрафенилборатом образуется стабильная суспензия. Мутность суспензии пропорциональна концентрации ионов калия в анализируемой пробе и измеряется фотометрически при длине волны 578 (570-590) нм.

Исследуемый материал. Свежая гепаринизированная плазма или сыворотка крови без следов гемолиза.

Состав набора.

1. Монореагент.

2. Калибратор (калибровочный раствор калия хлорида с концентрацией 5,0 ммоль/л).

Подготовка реагентов к процедуре анализа и их стабильность. Монореагент и Калибратор после вскрытия флакона можно хранить при +2-8°С в защищенном от света месте не более 6 месяцев.

Ход анализа

Приготовьте пробы в соответствии с табл. 15. Анализируемую пробу, калибратор и бидистиллированную воду внесите на дно пробирки и затем добавьте монореагент.

Таблица 15

Состав проб	Опытная проба	Калибровочная проба	Контрольная проба
Монореагент, мл	2,0	2,0	2,0
Сыворотка (плазма) крови, мл	0,05	–	–
Калибратор, мл	–	0,05	–
Вода дистиллированная, мл	–	–	0,05

Реакционную смесь перемешайте и инкубируйте точно 10 минут при комнатной температуре (+18-25°С). Непосредственно перед измерением оптической плотности пробы перемешать. Измерьте оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 578 (570-590) нм в кювете с длиной оптического пути 1,0 см.

Расчет концентрации калия в исследуемом образце проведите по формуле:

,

где С – концентрация калия в плазме крови в моль/л; Е пробы – оптическая плотность опытной пробы; Е калибратора – оптическая плотность калибровочной пробы; 5 ммоль/л – концентрация калия в калибраторе.

Нормальные значения концентрации калия: в сыворотке крови 3,6-5,5 ммоль/л; в плазме крови 4,0-4,8 ммоль/л.

ЗАДАНИЕ

1. Определите содержание калия в сыворотке и плазме крови.

2. Сделайте вывод.